反相高效液相色谱法测定兔眼玻璃体腔环孢素A浓度的研究

摘要

目的探讨反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定兔眼玻璃体腔环孢素A(CsA)浓度的可行性.方法兔眼玻璃体标本0.3ml经乙醚单步提取后,甲醇溶解回收,以C18硅胶键合相为固定相,乙腈∶水(76∶24)为流动相,流速:0.2ml/min,75℃柱温下进行色谱分析,紫外检测波长为200nm.结果 CsA兔眼玻璃体浓度在25～400ng/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.9981,该方法的平均回收率为97.7%,绝对回收率为88.3%,日内和日间精密度RSD均＜10%(n=5),最低检测限为10ng/ml.结论 RP-HPLC检测兔眼玻璃体腔CsA浓度结果可靠,适用性强,灵敏度高.