基因重组人巨细胞病毒pp150蛋白片段的原核表达及鉴定

摘要

目的以人巨细胞病毒(HCMV)AD169病毒株基因为模板,经PCR扩增了编码pp150蛋白片段的UL32基因,转入pMD18-T克隆载体后经酶切与表达载体pET-11a连接,转入大肠杆菌BL21,重组大肠杆菌经诱导表达pp150蛋白片段.经SDS-PAGE分析,其相对分子量约为21.5 kD,表达量约占菌体蛋白的16.38%,Western blot鉴定为阳性.表明成功构建了pp150蛋白片段的表达载体,并成功诱导表达了pp150蛋白,为进一步纯化该蛋白奠定了基础.