大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

摘要

目的 探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性.方法 采用Ficoll-PaqueTMPlus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定.流式细胞仪分析转染效率.结果 原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原.电穿孔法转染rMSCs转染率为32.8%±3%.结论 采用比重为1.077 g/L的Ficoll-PaqueTMPlus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增.电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rMSCs的效率.