RNA干扰对喉鳞癌Hep-2细胞增殖及VEG-C mRNA表达的影响

摘要

目的 观察载体介导的RNA干扰(RNAi)技术对人喉鳞癌Hep-2细胞增殖及其血管内皮生长因子C(VEGF-C)mRNA表达的影响. 方法 选择针对人特异性VEGF-C的小RNAi(siRNA)靶序列mRNA,分别设计、合成含有19 nt干扰序列的寡核苷酸(同时随机组合出一条对照序列),将两两互补的寡核苷酸经退火后所形成的序列克隆到pSuper-neo载体中构建重组体.脂质体法转染重组体至喉鳞癌Hep-2细胞,经G418筛选获得阳性克隆.用流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR检测其VEGF-C mRNA. 结果 转染VEGF-C靶向siRNA载体的Hep-2细胞生长减慢,S期细胞显著减少,VEGF-C表达水平明显下降. 结论 VEGF-C靶向RNAi重组体可显著抑制Hep-2细胞增殖及其VEGF-C mRNA的表达.