高氧对大鼠AECⅡ细胞的损伤及hMSC的干预作用观察

摘要

原代培养新生大鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)放入Transwell-Clear底层上(预置盖玻片),随机分为A、B、C、D 4组,每组6复孔.A、B组置于95%O2+5%CO2中培养,而C、D组则在95%空气+5%CO2中培养;24 h后留取上清并换液,A、C组在Inserts中加入人骨髓间充质干细胞(hMSC)进行共培养,而B、D组则不加;24 h后再留取上清.采用ELASA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNFα)、转化生长因子β1(TGFβ1)的含量;Hoechst染色检测Transwell-Clear底部AECⅡ细胞凋亡情况.免疫组化检测Transwell-Clear Inserts中人骨髓MSC特异性SP-A的表达情况.高氧暴露导致新生大鼠AECⅡ培养液中TNFα、TGFβ1含量增加,细胞凋亡增加.而与hMSC共培养后TNFα、TGFβ1含量降低,细胞凋亡减少.认为高氧暴露导致新生大鼠AECⅡ分泌功能改变,细胞凋亡增加;而与hMSC共培养对AECⅡ的损伤具有保护作用.