3种脂质体介导法转染大鼠小胶质细胞的比较研究

摘要

目的 以LipofectamineTM 2000为对照,研究GenEscortTM Ⅰ和GenEscortTM Ⅲ在大鼠小胶质细胞中的转染效率及毒性.方法 分别采用LipofectamineTM 2000、GenEscortTM Ⅰ和GenEscortTM Ⅲ为载体,转染绿色荧光蛋白(GFP)标记的siRNA进入大鼠小胶质细胞.计算转染效率.采用磺基罗丹明B法(SRB)分析转染试剂对细胞的毒性,并研究细胞传代次数、接种密度、脂质体与siRNA的比例及脂质体-siRNA复合物形成时间等对脂质体转染效率的影响.结果 2～3次细胞传代,接种密度为1×105(24孔板)、脂质体与siRNA比例为1:2.5、脂质体-siRNA复合物形成时间分别为30 min或15 min,转染效率最高.3种不同脂质体介导的GFP-siRNA转染的大鼠小胶质细胞内均有GFP表达,其最佳转染比例下转染效率比较为LipofectamineTM 2000组>GenEseortTM Ⅰ组>GenEscortTM Ⅲ组(P＜0.01);3种转染剂的细胞毒性比较为LipofectamineTM 2000组>GenEscortTM Ⅰ组>GenEscortTM Ⅲ组(P＜0.01).结论 阳离子脂质体GenEscortTM Ⅰ比LipofectamineTM 2000细胞毒性低,转染效率可,是一种更为理想的小胶质细胞基因转染载体.