BCL11A-siRNA对HEK293细胞增殖的影响

摘要

目的 设计靶向B细胞淋巴瘤/白血病11A基因的小干扰RNA(BCL1 1A-siRNA),并观察其对人胚胎肾细胞株HEK293细胞增殖的影响.方法 利用siRNA Target Finder工具,针对BCL11A设计合成siRNA319、siRNA585、siRNA2292、siRNA475.将HEK293细胞接种不含抗生素的培养基中,分为阳性对照组(PC组)、阴性对照组(NC组)、BCL11A-siRNA319组(si319组)、BCL11A-siRNA585组(si585组)、BCL11A-siRNA2292组(si2292组)、BCL11A-siR-NA475组(si475组)、空转组、细胞组.通过LipofectamineTM 2000,si319组将siRNA319、si585组将siRNA585、si2292组将siRNA2292、si475组将siRNA475分别转染HEK293细胞;转染后6h倒置荧光显微镜观察细胞转染情况并用流式细胞仪检测转染效率;转染后24、48、72 h,采用实时定量RT-PCR法观察BCL11A-siRNA对BCL11A基因表达的影响;CCK8法观察HEK293细胞体外增殖情况.结果 转染后24h,si585组、si2292组的HEK293细胞BCL11A基因表达降低,72 h逐渐恢复;si585组、si2292组细胞增殖受抑,与NC组、空转组、细胞组相比,P均＜0.05.结论 BCL11A-siRNA585及BCL11 A-siRNA2292可降低HEK293细胞中BCL1 1A基因表达,抑制细胞增殖.