Survivin D53A突变体对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的：观察Survivin D53A突变体对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞，随机分为空白对照组、脂质体组、pORF9组及Survivin D53A组。空白对照组不干预；脂质体组给予5μL阳离子脂质体DOTAP／Chol；PORF9组给予含2μg对照质粒pORF9和5μL阳离子脂质体DOTAP／Chol转染；Survivin D53A组给予含2μg Survivin D53A质粒和5μL阳离子脂质体DOTAP／Chol转染。各组转染后，采用PI染色观察细胞凋亡形态学变化，MTT法检测细胞存活率，克隆形成实验检测细胞克隆形成数目，流式细胞术检测细胞凋亡率。结果PI染色、荧光显微镜下观察，Survivin D53A组可见明显的细胞核碎裂以及凋亡小体，其余三组均未见细胞核碎裂以及凋亡小体。空白对照组、脂质体组、pORF9组、Survivin D53A组细胞存活率分别为100％、92．5％±4．3％、88．6％±8．5％、54．3％±3．7％，细胞克隆形成数目分别为（289．0±47．3）、（257．0±35．9）、（225．0±38．9）、（45．8±15．8）个，凋亡率分别为3．8％±1．4％、11．4％±3．7％、15．7％±2．5％和48．9％±7．1％。与其他三组比较，Sur－vivin D53A组细胞存活率、细胞克隆形成数目明显降低，细胞凋亡率明显升高（P均＜0．05）。结论 Survivin D53A突变体能够显著抑制宫颈癌细胞增殖，促进其凋亡。