高氧对人肺泡上皮细胞凋亡的影响及其作用机制

摘要

目的 观察高氧对人肺泡上皮细胞(HPAEC)凋亡的影响,并探讨其机制.方法 取对数生长期HPAEC细胞,随机分为高氧组和对照组.对照组细胞不作处理,放置于50 mL/L CO2培养箱中培养;高氧组细胞换液1次后,以3 L/min速度通入含900 mL/L O2和50 mL/L CO2高纯混合气,通入时间10 min;两组细胞均培养24h.采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化,免疫共聚焦检测细胞组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)转位情况,Western blotting法检测细胞SENP1蛋白、乙酰化p53蛋白.结果 高氧组和对照组细胞凋亡率分别为24.77％ ±2.17％、5.33％±2.60％,两组比较,P＜0.05.高氧组细胞从正常的长梭形、多角形变成圆形、椭圆形,细胞间的间隙增宽,悬浮的细胞较多;对照组细胞大多为长梭形、多角形,贴壁较好,细胞间的间隙较小,悬浮的细胞较少.高氧组和对照组细胞SIRT1蛋白转位率分别为88.89％、16.23％,两组比较,P＜0.05.高氧组和对照组细胞SENP1蛋白相对表达量分别为0.76 ±0.12、0.67 ±0.02,乙酰化p53蛋白相对表达量分别为0.81±0.07、0.52±0.03,两组比较,P均＜0.05.结论 高氧可促进HPAEC细胞凋亡,其机制可能是高氧诱导HPAEC细胞SENP1蛋白表达增加,进而SIRT1蛋白从胞核转位到胞质,使乙酰化p53蛋白表达增加.