绿原酸对人白血病阿霉素耐药株K562/ADM细胞多药耐药的影响及其机制

摘要

目的 观察绿原酸对人白血病阿霉素耐药株K562/ADM细胞多药耐药的影响,进一步探讨其作用机制.方法 取对数生长期的人白血病细胞株K562细胞和K562/ADM细胞,将不同浓度(2~64μmol/L))的绿原酸作用于K562/ADM细胞24 h后,采用MTT法检测绿原酸内在细胞毒性及对阿霉素(Adr)的增敏作用,并计算逆转倍数;流式细胞术检测经绿原酸处理后K562/ADM细胞内Adr和罗丹明123平均荧光强度;Western blotting法检测细胞多药耐药相关蛋白(MRP1)、P糖蛋白(P-gp)、t-Akt、p-Akt蛋白表达.结果 筛选出细胞抑制率<10%时的绿原酸浓度为4μmol/L以内,即为无毒剂量.绿原酸2、4μmol/L及Adr作用K562/ADM细胞后的逆转倍数分别为1.65、2.21倍.K562/ADM细胞内Adr平均荧光强度为184±22,用2、4μmol/L绿原酸处理K562/ADM细胞,加入Adr后,其荧光强度分别为223±26、326±35,绿原酸干预前后荧光强度比较,P均<0.05.绿原酸干预K562/ADM后细胞内MDR1、p-Pg、t-Akt、p-AKT蛋白表达受抑(P均<0.05),2、4μmol/L绿原酸处理K562/ADM细胞24 h后,MRP1、P-gp、p-Akt蛋白相对表达量分别为(77.34±1.143)%、(59.63±0.658)%、(37.41±0.575)%和(66.12±1.102)%、(51.33±0.658)%、(32.41±0.575)%.结论 绿原酸体外可有效逆转K562/ADM细胞多药耐药,其相关分子机制可能通过下调P13K/Akt信号通路抑制MRP1、P-gp蛋白表达实现.