沉默葡萄糖调节蛋白75对人肝癌细胞HCCLM3增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨沉默葡萄糖调节蛋白75(GRP75)表达对人肝癌细胞HCCLM3增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人肝癌细胞HCCLM3,随机分为对照组、siRNA-1组、siRNA-2组,采用脂质体转染法将siRNA导入siRNA-1组(上游序列5'-GAGACGGUUUCCAAAUGAATT-3',下游序列5'-UUCAUUUGGAAACCGUCUCTT-3')、siRNA-2组(上游序列5'-GCUCUAAGGCUUCCAACCUTT-3',下游序列5'-AGGUUGGAAGCCUUAGAGCTT-3'),对照组不予干扰序列.采用Western blotting法检测各组GRP75表达,采用CCK-8法检测各组转染2、24、48、96 h细胞增殖情况,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,siRNA-1组、siRNA-2组GRP75表达明显降低(P均＜0.01),以siRNA-2组降低更明显(P＜0.05).与对照组比较,siRNA-1组、siRNA-2组各时点细胞增殖能力均降低(P均＜0.01),且以siRNA-2组降低更明显(P＜0.01);与对照组比较,siRNA-1组、siRNA-2组细胞凋亡率均明显升高(P均＜0.01),且siRNA-2组升高更明显(P＜0.01).结论 沉默GRP75表达可抑制人肝癌细胞HCCLM3增殖活性,并促进其凋亡.