聚乙烯亚胺对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞TNF-α表达的影响

摘要

目的 观察聚乙烯亚胺(PEI)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 用含10％胎牛血清的高糖培养基培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞分成三组.空白组加入相同体积的培养基;LPS组加入10 ng/mL LPS;LPS+ PEI组先加入10 ng/mL LPS,10 min后再加入1 μg/mL PEI.培养2 h后real-time PCR法检测各组细胞中TNF-α mRNA表达,4 h后ELISA法检测各组上清中TNF-α.将RAW264.7细胞分成Alexa-LPS组和Alexa-LPS+ PEI组,Alexa-LPS组用10 ng/mL Alexa-LPS标记RAW264.7,Alexa-LPS+ PEI组先加入10 ng/mL Alexa-LPS,10 min后再加入1 μg/mL PEI,30 min后上流式细胞仪检测平均荧光光度值,比较两组细胞对Alexa-LPS的结合情况.结果 与空白组相比,LPS组TNF-α mRNA和蛋白表达均升高(P均<0.01);与LPS组比较,LPS+ PEI组TNF-α mRNA和蛋白表达均下降(P均<0.05).Alexa-LPS组和Alexa-LPS+ PEI组的细胞平均荧光光度值比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 PEI能够抑制LPS引起的巨噬细胞TNF-α表达,对LPS引起的炎症反应有一定抑制作用;该作用与PEI抑制巨噬细胞和LPS结合无关.