司美格鲁肽对脑缺血大鼠的治疗作用及机制

摘要

目的观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂司美格鲁肽对脑缺血大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法将72只大鼠随机分为假手术组、模型组、司美格鲁肽组、司美格鲁肽+LY294002组,每组18只。模型组、司美格鲁肽组、司美格鲁肽+LY294002组用线栓法建立大脑中动脉闭塞模型,假手术组分离结扎动脉但不插入线栓。司美格鲁肽+LY294002组造模前30 min经侧脑室注射10μL 10 mmol/L PI3K抑制剂LY294002,其余组给予同等剂量生理盐水。司美格鲁肽组及司美格鲁肽+LY294002组造模后即刻经腹腔注射司美格鲁肽溶液(10 nmol/kg),之后隔日空腹经腹腔注射司美格鲁肽溶液(10 nmol/kg),其余组注射等量生理盐水。分别于造模前及造模后1、3、5、7 d测量血糖;用Longa 5分制评分法对各组神经行为进行评价;TTC染色法观察脑梗死情况,计算脑梗死体积;TUNEL染色法检测缺血脑组织细胞凋亡情况;Western blotting法检测缺血脑组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路蛋白(PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT)及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3)表达,并计算p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT;用实时荧光定量PCR法检测缺血脑组织p53 mRNA表达。结果造模前后各组血糖水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与假手术组比较,模型组神经行为学评分、脑梗死体积比、凋亡细胞百分比及缺血脑组织中Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达和p53 mRNA表达高(P均<0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及Bcl-2蛋白表达低(P均<0.05);与模型组比较,司美格鲁肽组神经行为学评分、脑梗死体积比、凋亡细胞百分比及缺血脑组织中Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达和p53 mRNA表达低(P均<0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及Bcl-2蛋白表达高(P均<0.05);与司美格鲁肽组比较,司美格鲁肽+LY294002组神经行为学评分、脑梗死体积比、凋亡细胞百分比及缺血脑组织中Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达和p53 mRNA表达高(P均<0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及Bcl-2蛋白表达低(P均<0.05)。结论司美格鲁肽可改善脑缺血大鼠神经功能障碍,抑制神经细胞凋亡,减轻脑组织损伤;其作用机制可能与激活PI3K/AKT通路有关。