lncRNA GAS6-AS1靶向调控IL-11对子宫内膜基质细胞向成纤维细胞分化的影响

摘要

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响。方法体外传代培养ESCs,取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF-β_(1)未干预组和TGF-β_(1)干预组。TGF-β_(1)未干预组不予TGF-β_(1)干预,TGF-β_(1)干预组用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA GAS6-AS1、IL-11及纤维化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)mRNA表达。另取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,分别转染三条si-GAS6-AS1序列以及si-Control序列,采用RT-qPCR法验证转染效率。将转染si-GAS6-AS1的ESCs用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用Western blotting法检测IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与TGF-β_(1)未干预组比较,TGF-β_(1)干预组lncRNA GAS6-AS1、IL-11、α-SMA、COL1A1 mRNA相对表达量均显著升高(P均0.05)。因此,选择si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列进行后续实验。与si-Control+TGF-β_(1)组比较,si-GAS6-AS1-1+TGF-β_(1)组和si-GAS6-AS1-2+TGF-β_(1)组IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白相对表达量及细胞增殖活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P均<0.01)。结论lncRNA GAS6-AS1通过靶向调控IL-11表达抑制ESCs向成纤维细胞分化。