血管紧张素Ⅳ类似物Dihexa对脑出血小鼠的神经保护作用及其机制

摘要

目的观察血管紧张素Ⅳ类似物Dihexa对脑出血小鼠的神经保护作用,并探讨作用机制。方法将110只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、药物1组、药物2组、抑制剂组,每组22只。模型组、药物1组、药物2组、抑制剂组采用胶原酶法制备脑出血模型,假手术组以生理盐水代替胶原酶进行注射,其余操作与其他组一致。造模成功后,药物1组、药物2组分别予Dihexa 1.44、2.88 mg/(kg·d)灌胃,抑制剂组先后予wortmannin(PI3K选择性抑制剂)0.5 mg/(kg·d)、Dihexa 2.88 mg/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组给予等体积生理盐水,连续3 d。给药结束后采用改良Garcia评分评估神经功能缺损情况,检测脑组织含水量,HE染色观察脑组织病理改变,ELISA法检测脑组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β),TUNEL法检测神经细胞凋亡情况,Western blotting法检测脑组织中的凋亡相关蛋白(cleaved-Caspase3、Bcl-2)及磷脂酰激醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(AKT)通路蛋白。结果与假手术组相比,模型组、药物1组、药物2组、抑制剂组的脑组织含水量、脑组织中TNF-α、IL-1β、cleaved-Caspase3表达及神经细胞凋亡率增高,神经功能评分、脑组织中Bcl-2表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT降低(P均<0.05)。模型组、药物1组、药物2组的的脑组织含水量、脑组织中TNF-α、IL-1β、cleavedCaspase3表达及神经细胞凋亡率依次降低,神经功能评分、脑组织中Bcl-2表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT依次增高(P均<0.05)。抑制剂组脑组织含水量、脑组织中TNF-α、IL-1β、cleaved-Caspase3表达及神经细胞凋亡率高于药物2组,神经功能评分、脑组织中Bcl-2表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT低于药物2组(P均<0.05)。结论血管紧张素Ⅳ类似物Dihexa可以剂量依赖性减轻脑出血小鼠神经细胞凋亡和炎症反应,保护神经功能;其作用机制可能与调控PI3K-AKT通路有关。