无乳链球菌荚膜多糖的粗提及多糖含量测定条件优化

摘要

为提取无乳链球菌荚膜多糖,并对苯酚-硫酸法测定多糖含量条件进行优化.离心收集发酵上清液,超滤浓缩,经800 mL/L乙醇沉淀提取无乳链球菌荚膜多糖;采用单因素试验对苯酚硫酸法测定条件进行优化,并对测定方法的可靠性进行验证.结果表明,从1 L发酵液中提取到含量为38.51%的荚膜多糖0.36 g;测定的最佳条件为:2 mL样品液中,加入1 mL 50 mL/L的苯酚,5 mL浓硫酸,混匀后80℃作用20 min,在1.5 h内测定485 nm处的光密度.在该条件下,平均加样回收率为99.96%,相对标准偏差为0.40%.说明从无乳链球菌发酵上清液中成功提取到荚膜多糖,建立了苯酚硫酸法测定荚膜多糖的最优条件.