丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1在放射性肺纤维化中的作用及其机制研究

摘要

目的 分析丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)在放射性肺纤维化(RIPF)中的作用及其机制。方法2021年3月至2022年2月,将30只2月龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为对照组、模型组和干预组,各10只。对照组小鼠不进行干预;模型组和干预组小鼠均构建RIPF模型,建模成功后干预组小鼠腹腔注射SRPK1抑制剂——SRPIN340,模型组小鼠给予相同剂量的PBS;两组均干预16周,其中模型组小鼠死亡5只,干预组死亡3只。干预结束后收集各组小鼠全肺组织及肺泡灌洗液,采用HE染色观察小鼠肺组织结构,Masson染色观察小鼠肺组织细胞外基质(ECM)沉积情况,羟脯氨酸试剂盒检测小鼠肺组织羟脯氨酸水平,ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-13、转化生长因子β(TGF-β)1水平,免疫荧光法检测小鼠肺组织CD45+T淋巴细胞计数,免疫组化法检测小鼠肺组织精氨酸酶1(Arg-1)、SRPK1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果 HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织出现明显的损伤和结构紊乱,肺泡壁增厚扭曲,可见大量病灶形成;干预组小鼠肺组织出现轻微损伤,肺组织结构较模型组完整,肺泡壁增厚现象减少。Masson染色结果显示,模型组小鼠肺组织中出现大量ECM沉积;与模型组相比,干预组小鼠肺组织ECM沉积明显减少。模型组、干预组小鼠肺组织羟脯氨酸水平高于对照组(P<0.05);干预组小鼠肺组织羟脯氨酸水平低于模型组(P<0.05)。模型组、干预组小鼠肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-13、TGF-β1水平高于对照组(P<0.05);干预组小鼠肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-13、TGF-β1水平低于模型组(P<0.05)。模型组、干预组小鼠肺组织CD45+T淋巴细胞计数高于对照组(P<0.05);干预组小鼠肺组织CD45+T淋巴细胞计数低于模型组(P<0.05)。模型组小鼠肺组织Arg-1、SRPK1、α-SMA表达水平高于对照组(P<0.05);干预组小鼠肺组织Arg-1、SRPK1表达水平高于对照组、低于模型组,α-SMA表达水平低于模型组(P<0.05)。结论 SRPK1可促进RIPF的发生发展,其可能机制为SRPK1促进肺组织内巨噬细胞向M2型极化,激活成纤维细胞,进而促进肺纤维化。