一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法

摘要

番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus (ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害.开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义.利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性.结果 表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带.扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测.