香鱼(Plecoglossus altivelis)CC型趋化因子受体3(CCR3)基因的分子鉴定及其对鳗弧菌感染响应的研究

摘要

CC趋化因子受体3(CCR3)是CC型趋化因子的受体,属于G蛋白耦联受体(GPCRs)家族成员,与过敏等多种炎性疾病密切相关.为探讨香鱼CCR3 (PaCCR3)在响应鳗弧菌感染时的表达变化,从转录组测序数据中获得了PaCCR3基因全长cDNA序列.序列分析表明,PaCCR3具有7次跨膜结构,与胡瓜鱼CCR3氨基酸序列同源性最高(84.6％).系统进化树分析表明,哺乳类、两栖类和鱼类CCR3单独成簇,鱼类CCR3形成一个大簇;PaCCR3与胡瓜鱼CCR3进化相关性最高.实时荧光定量PCR结果显示,PaCCR3基因mRNA在单核/巨噬细胞(MO/MΦ)中表达量最高;鳗弧菌感染后肝、脾和头肾中PaCCR3基因mRNA表达量显著上调;且香鱼MO/MΦ经鳗弧菌体外刺激后,PaCCR3基因mRNA的表达量显著上调.Western blot分析表明经鳗弧菌体外刺激后,香鱼MO/MΦ中PaCCR3蛋白的表达量也显著增加.综上,PaCCR3基因mRNA及其编码蛋白响应于病原体感染而被诱导表达.研究结果首次揭示了香鱼CCR3基因mRNA及蛋白的表达响应于鳗弧菌侵染,它可能通过介导MO/MΦ的功能活性参与免疫应答,可为深入探究鱼类CCR3的功能及作用机制提供新的切入点.