来自大黄鱼(Pseudosciaena crocea)肠道的弧菌拮抗菌的筛选与鉴定

摘要

采用点种法并以副溶血弧菌(Vpl.2164)和溶藻弧菌(Va-Y)为弧菌指示菌,对从健康的大黄鱼肠道内分离的115株细菌进行体外拮抗试验.并对筛选出的拮抗茵进行抗菌谱测定,最后利用VITEK-32细菌快速鉴定系统和16S rRNA基因序列对拮抗菌进行鉴定.结果表明.从中筛选到3株有较强拮抗作用的菌株,编号分别为X1402-1、X1108和X3914,且菌株X1402-1的抗菌作用最强,抗菌谱最广,21株病原指示菌中,对16株均能产生较强的抑制作用,其中对Vp-1.2164的抑菌直径最大,达到28.5mm,对Va-Y的抑菌直径为8.7mm;其次为菌株X1108和X3914.对两种指示弧菌的抑菌直径分别为:12.0mm、9.0mm和0mm、7.2mm.经VITEK-32细菌快速鉴定系统鉴定,3株拮抗茵分别与铜绿假单胞菌,恶臭假单胞菌,地衣芽孢杆菌的相似性均为99%.通过16S rRNA基因序列分析表明,3株拮抗菌分别与类产碱假单胞菌Pseudomonas pseudoalcaligenes (EU419918)、恶臭假单胞菌Pseudomonas putida (FJ440105)和地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis (DQ988136)的16S rRNA基因同源性最高,分别为100.0%、97.5%、99.0%.综合分析试验结果,X1402-1、X1108和X3914分别被确定为类产碱假单胞菌、恶臭假单胞菌和地衣芽孢杆菌.