草鱼(Ctenopharyngodon idellus)呼肠孤病毒(GCRV)VP6相互作用蛋白的筛选

摘要

为筛选与草鱼呼肠孤病毒GCRV096 VP6发生相互作用的宿主蛋白,先将VP6基因的PCR扩增产物,克隆至酵母表达载体pGBKT7以构建其诱饵质粒(pGBKT7-VP6);再将酵母菌Y2HGold(含pGBKT7-VP6)与酵母菌Y187[含草鱼肾脏细胞(CIK)cDNA文库质粒]进行人工诱导融合,然后经选择培养筛选阳性克隆.结果共筛选到4株阳性克隆,经测序、生物信息学分析,分别属于两条不同的核苷酸序列,其中之一所编码的产物与GAPDH (3-磷酸甘油醛脱氢酶)同源性较高.可见,该酶极可能在GCRV096侵染宿主的初期发挥着重要作用.