三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)胞内氯离子通道蛋白基因克隆及其表达分析

摘要

本研究克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)胞内氯离子通道蛋白基因,命名为PtCLIC.该基因cDNA全长2000bp,5'和3'非编码区(UTR)长分别为76bp和l162bp,开放阅读框长762bp,推测编码253个氨基酸,预测分子量为29.2kDa,理论等电点为5.93.生物信息学分析表明,PtCLIC基因中未发现跨膜结构域,属于不稳定蛋白;同源性分析表明,PtCLIC基因编码的氨基酸序列与蚤状溞(Daphnia pulex)CLIC基因的同源性高达83％;系统进化分析表明,三疣梭子蟹与拟穴青蟹首先聚为一支;实时荧光定量RT-PCR分析表明,PtCLIC基因在选取的所有组织中均有表达,在肝胰腺中的相对表达量最高,且显著高于其它组织(P＜0.05).低盐度胁迫显著改变了PtCLIC基因在三疣梭子蟹鳃和肝胰腺中的表达模式,整体呈先上调后下调的趋势,并发现该基因在低盐耐受和低盐敏感家系中的表达规律差异显著.研究结果表明PtCLIC基因在三疣梭子蟹渗透压调节中发挥重要作用,可辅助三疣梭子蟹耐低盐品系的选育.