大黄鱼(Larimichthys crocea)补体调节因子CFH和CFHR2基因的分子特征及表达分析

摘要

补体是鱼类免疫系统重要的组分,具有识别和消除外来病原体,激活免疫细胞,调控获得性免疫等功能.在免疫组织中,补体调节因子大约占据了补体成分的二分之一,当受到外界病原刺激时会迅速活化补体成分,并且进一步聚合形成酶复合物发挥一系列免疫效应.CFH和CFHR2是补体替代途径重要的调节因子,对于补体系统正常运转必不可少.为此,本文测定了大黄鱼补体调节因子CFH和CFHR2基因的cDNA全序列,并对基因组织特异性表达和溶藻弧菌刺激后基因mRNA表达量的变化等方面进行了研究.CFH和CFHR2序列全长分别为1332 bp和1170 bp,分别编码443和389个氨基酸,N端信号肽序列分别为24和32个氨基酸.推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼CFH和CFHR2基因具有RCA蛋白家族的典型特征,即含有多个保守的CCP结构(补体控制蛋白).实时荧光定量PCR结果显示,CFH和CFHR2在健康大黄鱼的肝、脾、肾、肠、脑、胃、心和肌肉这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量显著高于其它几种组织.溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染了健康的大黄鱼之后,CFH和CFHR2的mRNA表达量均明显上调,并且随着感染时间的变化呈现不同的上升趋势.结果表明补体调节因子mRNA表达量的变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,表明了CFH和CFHR2可能在大黄鱼自身免疫机制中发挥重要的作用.