文蛤(Meretrix meretrix)C-型凝集素基因的分子克隆及表达分析

摘要

C-型凝集素是一种重要的模式识别蛋白,本研究以文蛤为材料.利用PCR扩增和RACE技术首次获得了编码文蛤C-型凝集素的基因(Mm-CTL)cDNA序列,全长为1855bp,其开放阅读框为519bp,编码172个氨基酸.Smart软件预测Mm-CTL的糖识别结构域(CRD)从第34个氨基酸到第168个氨基酸.BLASTP序列相似性分析显示,Mm-CTL与大竹蛏氨基酸序列同源性最高,相似性为56.5％,与其它无脊椎动物的相似性为13.5％-23.9％.系统进化树分析与同源分析结果一致,其中Mm-CTL与双壳类C-型凝集素聚在一起,与大竹蛏亲缘性最近.环境胁迫实验显示,溶藻弧菌感染6h时Mm-CTL表达量明显上升,在12h时达到最高值,随后有所下降.盐度胁迫时Mm-CTL在盐度5时表达量相对较低,在盐度10-20中的表达量相对较高.温度胁迫时Mm-CTL在35℃时表达量相对最高,10℃时表达量明显较低.研究结果表明,文蛤应对环境因子影响可通过调节Mm-CTL的表达来应答免疫反应.本研究将为贝类先天性免疫因子研究以及病害的防控奠定基础.