粪便DNA甲基化标志物检测在胃癌筛查中的应用

摘要

目的探讨粪便DNA甲基化标志物检测用于胃癌筛查的可行性以及与胃癌患者临床特征的关系。方法前瞻性收集2018年8月至2019年12月在苏州大学附属第一医院普通外科及消化内科就诊的胃癌患者及胃镜检查阴性者的粪便样本共156份,同时收集胃癌患者术前及术后的临床资料。按照1∶2的比例将这些样本随机分成训练集（n=52）和测试集（n=104）。提取粪便中的DNA,然后检测Syndecan-2黏结蛋白聚糖2基因（SDC2）、分泌性卷曲蛋白2基因（SFRP2）、Ras相关区域家族2基因（RASSF2）、端粒酶逆转录酶基因（TERT）甲基化水平,同时用免疫胶体金法检测粪便中血红蛋白（Hb）含量。使用单项粪便DNA标志物的Ct（Cycle threshold荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数）值建立logistic 回归模型,分析单个标志物检测胃癌的灵敏度和特异度;基于Akaike信息准则（AIC）,使用多因素逻辑回归及逐步回归分析筛选最优的标志物组合,并在测试集中评价胃癌早期筛查标志物组合筛查/检测胃癌的效果。结果各标志物区分胃癌和阴性对照的准确度排序为:SDC2甲基化（71.2%）＆TERT甲基化（67.3%）=RASSF2甲基化（67.3%）＆Hb（63.5%）＆SFRP2甲基化（61.5%）。通过逐步回归分析,在训练集中筛选出一个由SDC2甲基化、TERT 甲基化和Hb组成的粪便生物标志物组合,在训练集及测试集中检测胃癌的总灵敏度为 66.7%,总特异度为 78.9%。在不同分期以及不同部位胃癌样本中,该标志物组合对Ⅰ期胃癌及胃体部胃癌的灵敏度（分别为78.6%、75.0%）最高。结论粪便中SDC2、SFRP2、TERT、RASSF2基因甲基化标志物在胃癌筛查中具有一定的灵敏度和较高的特异度,是胃癌早期筛查中的潜在粪便生物标志物。