长链非编码RNA FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制

摘要

目的 检测膀胱癌组织及细胞株中长链非编码RNA（lncRNA）FLJ37505的表达,分析FLJ37505对膀胱癌细胞增殖和迁移影响的作用机制。方法 实时荧光定量PCR（qPCR）分析63例膀胱癌和癌旁组织（来自2018年1月至2019年3月苏州大学附属第二医院泌尿外科膀胱癌手术切除的标本）和膀胱癌细胞株（T24、J82、5637、BIU-87和UM-UC-3,均购自上海生命科学院细胞所）中FLJ37505的相对表达。将FLJ37505相对表达最少的膀胱癌细胞株根据随机数字法分为对照组（转染空白质粒）和FLJ37505组（转染载有FLJ37505序列的质粒）。MTS法和划痕实验分别检测上调FLJ37505的表达对细胞增殖和迁移能力的影响。生物信息学预测FLJ37505的靶基因。双荧光素酶报告基因系统检测FLJ37505与靶基因的结合。qPCR和Western印迹分别检测上调FLJ37505对靶基因表达的影响。结果 与癌旁组织相比,FLJ37505在膀胱癌组织表达较低[（4.90±0.79）比（0.89±0.28）,P＆0.05]。与人正常膀胱上皮细胞相比,FLJ37505在膀胱癌细胞株表达较低（P＆0.05）,其中FLJ37505在UM-UC-3细胞中的表达最低（P＆0.01）。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中FLJ37505表达较高[（0.79±0.04）比（9.92±1.17）,P＆0.01]。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力均被抑制（均P＆0.01）。生物信息学显示,FLJ37505的靶基因是miR-203a-3p,miR-203a-3p的靶基因是二型磷脂酰肌醇4磷酸酶（INPP4B）。双荧光素酶报告基因系统显示FLJ37505可互补结合miR-203a-3p（P＆0.01）,miR-203a-3p可互补结合INPP4B mRNA（P＆0.01）。与对照组相比,FLJ37505组UM-UC-3细胞中miR-203a-3p的表达较低[（1.00±0.05）比（0.20±0.02）,P＆0.01],INPP4B在mRNA和蛋白水平的表达均明显增加（均P＆0.01）。结论 膀胱癌组织和膀胱癌细胞中FLJ37505的表达较低,上调FLJ37505可显著抑制膀胱癌UM-UC-3细胞的增殖能力和迁移能力,其作用机制可能是通过吸附miR-203a-3p进而上调INPP4B基因的表达。