放射诱导经Egr-1启动子调控的腺病毒介导CDglyTK基因的肿瘤靶向表达

摘要

目的构建由Egr-1 基因启动子驱动CDglyTK基因表达的腺病毒载体,通过放射诱导调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,用于肝癌的基因-放射治疗.方法利用细菌内高效同源重组法,制备腺病毒载体AdEgr-CD/TK.MM45T.Li 肝癌细胞感染AdEgr-CD/TK后,体外观察γ射线照射诱导CDglyTK基因表达及在前药5-FC、GCV存在的条件下细胞相对存活率的变化.利用荷瘤小鼠肝癌模型观察不同处理的抑瘤效应.结果体外实验结果显示,γ射线照射可明显诱导CDglyTK基因在MM45T.Li 肿瘤细胞内的表达,并呈剂量依赖性;显著增强细胞对前药5-FC、GCV的敏感性(P<0.01);当5-FC和GCV同时存在时具有明显的协同效应.体内抗肿瘤实验结果提示,与单纯肿瘤局部照射(TLI)、瘤内注射AdEgr-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCV等处理组相比,瘤内注射AdEgr-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCV合并TLI组的抗瘤效果最好(P<0.01), 并可使30%的肿瘤完全消退,且未见全身毒性反应的增加.结论利用放射调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,是一种安全、有效的肿瘤基因治疗新策略.