反义Smad4基因对贮脂细胞系CFSC生物学特性的影响

摘要

目的探讨通过反义Smad4基因转移阻断转化生长因子β1(TGF-β1)的信号传导后对贮脂细胞部分生物学特性的影响.方法分别构建、重组了含有反义Smad4基因序列的复制缺陷型腺病毒表达载体AdvATSmad4和空病毒表达载体Adv0.将两种复制缺陷型腺病毒扩增纯化,再分别转入贮脂细胞系CFSC内,测定它们生长曲线、3H掺入率(3H-TdR)、脯氨酸掺入等部分生物学特性的变化,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western 印迹和免疫组织化学等方法检测转基因细胞Smad4和细胞外基质的表达.结果与正常对照组CFSC和转染Adv0的CFSC细胞相比较,转染AdvATSmad4的CFSC细胞内有反义Smad4表达,其生长曲线、3H-TdR、脯氨酸掺入等均有不同程度的降低,且其合成分泌Smad4和细胞外基质减少.结论反义Smad4 基因可以抑制贮脂细胞内源性Smad4的表达,抑制贮脂细胞的生长、繁殖和细胞外基质的产生,可作为抗肝纤维化基因治疗的选择之一.