瘦素及胰岛素对人类肝细胞癌细胞系细胞瘦素受体mRNA表达的作用

摘要

目的研究瘦素及胰岛素对瘦素受体(OB-R)的调节作用.方法以人类肝细胞癌细胞系(HepG2)为实验摸型,采用6孔板培养皿培养HepG2细胞,4个孔作为一个浓度组,通过DNA序列测定及半定量的逆转录-聚合酶链反应等方法,分别观察了0、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L 浓度的人类瘦素及胰岛素对HepG2细胞内瘦素受体mRNA表达水平的影响.结果通过RT-PCR及DNA序列测定,我们证明了HepG2细胞含有瘦素长型受体(Ob-Rb)及短型受体(OB-Ra:OB-R219.3);通过半定量RT-PCR,我们检测了Ob-Rb 和OB-R219.3的mRNA表达水平.当HepG2细胞与不同浓度的瘦素孵育24 h后,10-7～10-6 mol/L浓度的瘦素明显抑制了OB-Rb的mRNA表达,并在10-6 mol/L浓度时达到最大抑制为43%;同样10-8～10-6mol/L浓度的瘦素亦明显抑制了OB-R219.3的mRNA表达,并在10-6 mol/L浓度时达到最大抑制为49%.当HepG2细胞与不同浓度的胰岛素孵育24 h后, OB-Rb及OB-R219.3的mRNA表达水平无改变.结论在HepG2细胞内瘦素对OB-Rb及OB-R219.3的mRNA表达有下调作用,而胰岛素对OB-Rb及OB-R219.3的mRNA表达无调节作用,这对与我们了解瘦素抵抗及瘦素的外周功能具有重要意义.