高糖通过PI3K-Akt信号途径抑制内皮细胞迁移和增殖及血管发生改变

摘要

目的观察高糖对内皮细胞迁移、增殖和血管发生改变及PI3K-Akt信号途径的影响。方法不同浓度（5、15、30mmol/L）D-葡萄糖处理后,用体外“伤口愈合”实验、细胞增殖试剂盒和缺乏生长因子的Matrigel胶观察内皮细胞迁移、增殖和血管发生情况,并用免疫沉淀和Western印迹检测p85/PI3K、磷酸化PI3K、Akt、磷酸化Akt（苏氨酸308）和磷酸化GSK3β的表达变化。观察加入PI3K抑制剂——LY294002后,内皮细胞的迁移、增殖和血管发生的变化。结果与5mmol/LD-葡萄糖组（细胞迁移数为100个/μm2±23个/μm2,增殖细胞数为59128个/孔±7415个/孔）相比,15mmol/L和30mmol/LD-葡萄糖组内皮细胞迁移明显降低（77个/μm2±18个/μm2和46个/μm2±18个/μm2,均P＜0·01）、细胞增殖（33144个/孔±9082个/孔和11625个/孔±4196个/孔,均P＜0·01）和血管发生改变（包括血管床面积、平均血管长度、毛细血管数和血管分支点数）及磷酸化PI3K、磷酸化Akt（苏氨酸308）和磷酸化GSK3β的表达（均P＜0·05或P＜0·01）,且随葡萄糖浓度增高抑制作用增强（均P＜0·05或P＜0·01）。0·1、1和10μmol/L的LY294002抑制内皮细胞迁移（细胞迁移率分别为68μm2±16μm2、36μm2±12μm2和13μm2±3μm2,均P＜0·01）、增殖（增殖细胞数分别为42560个/孔±4213个/孔、17688个/孔±7198个/孔和5704个/孔±558个/孔,均P＜0·01）和血管发生水平（均P＜0·05或P＜0·01）,且随LY294002浓度增高抑制作用增强（均P＜0·05）。结论高糖可能通过PI3K-Akt信号途径抑制内皮细胞的迁移、增殖和血管发生变化。