慢性乙型肝炎病毒感染对人肝细胞色素酶 P450 3A4的影响

摘要

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染对人肝脏细胞色素酶3A4（CYP3A4）的影响,为慢性 HBV 感染患者安全用药提供指导。方法收集慢性 HBV 感染患者和正常人的肝组织标本,匀浆后以差速离心法制备成微粒体。以睾丸酮为探针底物,用高效液相色谱（HPLC）方法建立体外检测 CYP3A4酶代谢活性的技术平台,检测两组肝组织样本中 CYP3A4的酶活性。以 Western 印迹法测定了两组肝组织样本中 CYP3A4蛋白的表达差异。结果 HPLC 检测显示,反映酶活力的指标Vmax:慢性 HBV 感染组为（493±297）pmol·min-1·mg-1,正常对照组为（741±189）pmol·min-1·mg-1,两组差异有统计学意义（P=0.03）,而酶系特征性常数 Km 值两组分别为:（0.142±0.057）μmol/L,（0.121±0.024）μmol/L,差异无统计学意义（P=0.103）。Western 印迹测定 CYP3A4蛋白表达两组差异有统计学意义（P=0.003）,慢性 HBV 感染组 CYP3A4蛋白表达为3.0±1.6,低于正常组的表达量（5.7±1.5）。各样本酶活性和蛋白表达的相关系数为0.7683（P＜0.01）,表明酶活性与蛋白表达呈现良好的相关性。结论慢性 HBV 感染可降低肝脏 CYP3A4酶蛋白的表达,导致酶活性下降,但是对酶的结构未产生影响。提示慢性 HBV 感染者在使用由 CYP3A4代谢的药物时,要重视由于代谢变化导致的副作用。