一氧化碳对肢体缺血再灌注患者血清所致中性粒细胞凋亡的影响及核因子κB 的作用

摘要

目的观察外源性一氧化碳（CO）对肢体缺血再灌注（IR）患者血清所致中性粒细胞（PMN）凋亡的影响及核因子（NF）kB 的作用。方法分离培养人外周血 PMN,置于24-孔培养板,分为4组（n=16）:对照组,对照+CO,IR 和 IR+CO 组。IR 和 IR+CO 组细胞应用肢体 IR 患者血清代替培养基孵育,其余两组应用健康志愿者血清培养。IR+CO 组和对照+CO 组细胞置含有0.025%CO 和5% CO2的空气中孵育。对照组和 IR 组细胞始终在含5%CO2空气中孵育。应用流式细胞学技术检测 PMN 凋亡率,进行 PMN DNA 电泳观察梯状带情况,应用电泳迁移率（EMSA）检测 PMN 核内 NF-kB 活性。结果与对照组相比,IR 组 PMN 凋亡百分率显著降低、NF-kB 活性明显增强;与 IR组相比,IR+CO 组 PMN 凋亡百分率显著增高、NF-kB 活性明显降低,出现典型 DNA 梯状带。结论外源性 CO 可改善肢体 IR 患者血清所致的 PMN 凋亡抑制,其机制与下调 NF-kB 活性有关。