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胰腺内分泌前体细胞的培养及鉴定

         

摘要

目的探讨培养胰腺内分泌前体细胞的方法及效果。方法在较高糖浓度(33.3 mmol/L)且含血清的培养基中培养新生大鼠胰腺组织,得到可增殖传代的细胞;然后转入较低糖浓度(13.2 mmol/L)无血清的培养基中继续培养7 d;以电镜、双硫腙染色、免疫细胞化学、放射免疫(胰岛素测定)等方法鉴定培养细胞并利用裸鼠糖尿病模型观察培养细胞在体内对于血糖的影响。结果培养细胞胰腺内分泌前体细胞标记神经生长素3阳性;经低糖培养基培养后,双硫腙染色阳性细胞比率由10%±3%提高至32%±6%,胰岛素分泌能力上升,由(22.7±3.6)μU/ml升高至(26.0±2.2)μU/ml,P<0.05,糖浓度20 mmol/L。体内实验证实培养细胞能够延长裸鼠糖尿病模型的生存期(10.0 d vs 5.6 d,P<0.05)。结论特定糖浓度培养基有利于胰腺内分泌前体细胞的培养,其中低糖培养基有利于促进内分泌前体细胞的分化成熟。

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