颞叶癫痫相关突触后致密物蛋白质的蛋白质组学筛选研究

摘要

目的筛选颞叶癫痫（TLE）相关突触后致密物（PSD）蛋白分子。方法建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型;收集颞叶癫痫组（TLE 组）、非颞叶癫痫组（非 TLE 组）以及正常对照组（Norm）3组的新鲜全脑组织,联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取 PSD;进行双向凝胶电泳,并通过 PDQuest 图像分析软件比较分析,筛选 TLE 组特异性和差异性表达的蛋白质点;选取部分差异蛋白质点进行取 MALDI-TOF-MS 质谱鉴定;应用 Western 验证部分所鉴定蛋白质在 PSD 中的表达状况。结果与 Norm 和非 TLE 组比较,TLE 组中存在40个差异表达蛋白质点,表达上调的主要有热休克蛋白27（HSP-27）、果糖二磷酸醛缩酶（FBA）、肌酸激酶（CK）、甲状腺受体相互作用蛋白6（TRIP6）、髓鞘碱性蛋白 S（MBP）、LIM 结构域（LIM）;表达下调的主要有细胞骨架蛋白、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶（PPIase）、分选连接蛋白3（SNX3）、乌头酸水合酶（ACO）、甘油醛三磷酸脱氢酶（GAPDH）、琥珀酸辅酶 A 连接酶（SCOAL）。HSP27和微管蛋白α、SNX3在 TLE、非 TLE 和 Norm 3组 PSD 中均免疫染色阳性。结论 TLE 组 PSD 蛋白质差异性表达可能是脑损伤后可塑性反应的结果,但其表达量改变的程度可能与颞叶癫痫形成有关,可视为促/抗 TLE 形成的重要候选分子。