γ-分泌酶抑制剂对神经干细胞增殖和分化的影响

摘要

目的探讨γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S 苯基甘氨酸 t-丁酯（DAPT）与神经干细胞增殖、分化的关系。方法分离和体外培养大鼠脑神经干细胞（NSC）,采用γ-分泌酶抑制剂 DAPT 处理后,细胞计数和 CCK8检测法观察 NSC 增殖能力的变化;特异性荧光免疫染色检测NSC 诱导定向分化能力的变化;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测 Notch 信号途径节点分子基因RBP-Jk 和 Hes1的表达。结果 DAPT 能够明显抑制 NSC 的增殖能力;与对照组相比,NSC 诱导分化为神经元和少突胶质细胞的比例分别由（3.7±1.0）%和（4.8±1.2）%上升为（13.8±1.2）%和（14.8±1.6）%,而分化成星形胶质细胞的比例由（82.8±3.7）%下降为（63.4±1.2）%;DAPT 能下调 NSC 的 RBP-Jk 和 Hes1 mRNA 的表达。结论γ-分泌酶抑制剂 DAPT 能抑制大鼠脑 NSC 的增殖,改变 NSC 定向分化的能力,这些作用可能是通过抑制γ-分泌酶而下调 Notch 信号所致。