金黄色葡萄球菌对人脐静脉内皮细胞、人羊膜细胞细胞骨架重排及其诱导凋亡的作用

摘要

目的探讨金黄色葡萄球菌（S.aureus）入侵人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、人羊膜细胞（WISH）细胞骨架微丝、微管变化及其诱导细胞凋亡作用。方法常规方法制备S.aureus悬液,分别感染人脐静脉内皮细胞和人羊膜细胞10、30、60、120 min。采用光学显微镜和荧光显微镜观察S.aureus感染和细胞骨架微丝、微管重排情况;采用DAPI荧光染色和DNA琼脂糖凝胶电泳分析S.aureus对HUVEC细胞诱导凋亡的影响。结果S.aureus与HUVEC和WISH细胞共育10min,即有细菌侵入,60 min后,HUVEC和WISH细胞的感染率分别达（54.9±2.4）%和（56.1±2.4）%;入侵HUVEC细胞和WISH细胞10、30、60、120 min时,触发微丝肌动蛋白（F-actin）重排百分率分别为（54.7±2.8）%、（63.0±2.9）%、（71.0±2.6）%、（39.5±2.7）%和（63.3±2.6）%、（65.0±2.9）%、（77.0±2.4）%、（44.0±1.8）%。10、30、60 min的F-actin重排百分率明显高于120 min（P＜0.05）,此时微管变化不大;S.aureus感染HUVEC细胞60 min时,DAPI荧光染色和DNA琼脂糖凝胶电泳均可出现细胞凋亡现象。结论S.aureus在入侵HUVEC和WISH细胞时,可能通过F-actin细胞骨架重排来完成侵袭过程,且细菌侵入60 min后可诱导HUVEC细胞出现凋亡。