鞘氨醇激酶在人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达及其作用

摘要

目的探讨鞘氨醇激酶（SphK）1和SphK2在人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达及其作用。方法取12例瘢痕疙瘩患者手术切除的瘢痕疙瘩及其周围正常皮肤标本,原代组织块法培养成纤维细胞,分为正常皮肤组、瘢痕疙瘩组和瘢痕疙瘩加转化生长因子β1（TGF-β1）组（瘢痕疙瘩+TGF-β1组）。用免疫荧光法观察各组细胞中SphK1和SphK2蛋白的分布;实时PCR法检测SphK1和sphK2 mRNA的表达;蛋白质印迹法检测SphK1和sphK2蛋白的表达。结果 Sphk1蛋白在3组成纤维细胞中均主要分布于细胞核;而Sphk2蛋白在细胞核和胞质中均有表达。瘢痕疙瘩组SphK1mRNA和蛋白表达（分别为0.0608±0.0190、0.8308±0.1093）明显高于正常皮肤组（分别为0.0383±0.0147、0.6800±0.1126,均P＜0.05）,但明显低于瘢痕疙瘩+TGF-β1组[分别为0.0790±0.0280（P＜0.05）、1.4267±0.1938（P＜0.01）];SphK2 mRNA和蛋白在3组中的表达差异无统计学意义（均P＞O.05）。结论 SphK1在瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖过程中具有重要作用。TGF-β1可促进SphK1在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达,提示SphK1可能参与了TGF-β信号转导通路的调节。