T-bet基因修饰树突细胞对哮喘模型小鼠气道炎症的阻抑和逆转作用

摘要

目的探讨T-bet基因修饰树突细胞（DC）用作哮喘治疗策略的可行性和机制。方法将从小鼠骨髓单个核细胞诱导培养获得的DC分2组,分别以腺病毒载体介导的方法转染T-bet基因和β-半乳糖苷酶（LacZ）基因,另设空白对照组,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测3组DC培养液中干扰素γ（IFN-γ）水平。以卵清蛋白（OVA）腹腔注射致敏（第1、15天）和雾化吸入激发（第29～31天）方法制备哮喘小鼠模型和哮喘再激发模型（第45～47天雾化吸入OVA）,分别用于气道炎症阻抑试验和气道炎症逆转试验,各设正常对照组、模型对照组、激发或再次激发前静脉注射T-bet基因修饰DC组（T-bet组）和静脉注射LacZ基因修饰DC组（LacZ组）,每组8只小鼠。阻抑和逆转试验小鼠分别于建模第37和49天处死,ELISA检测血浆IFN-γ和白细胞介素4（IL-4）水平,取肺脏行常规组织病理学检查。结果转染T-bet基因组DC培养液中IFN-γ/水平（ng/ml）为15.24±4.75,明显高于转染LacZ组和空白对照组（分别为3.08±0.61、2.35±0.41,均P＜0.01）。气道炎症阻抑和逆转试验中,T-bet组小鼠血浆IFN-γ水平（pg/ml）分别为130.2±10.5、145.7±16.7,均明显高于正常对照组（分别为25.0±6.5、24.6±5.9,均P＜0.01）、模型对照组（分别为20.7±4.5、16.5±7.0,均P＜0.01）和LacZ组（分别为17.6±7.0、24.2±9.0,均P＜0.01）,而IL-4水平均低于模型对照组和LacZ组（均P＜0.01）。组织病理学检查显示T-bet组小鼠气道炎症表现明显轻于模型对照组和LacZ组。结论以T-bet基因修饰DC为基础的哮喘治疗策略是可行的,其机制可能与T-bet基因修饰可提高DC的IFN-γ表达水平从而在抗原呈递水平干预辅助性T细胞的分化有关。