人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型的建立及其意义

摘要

目的建立人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型,观察人正常颈椎椎体和退变颈椎椎体终板软骨细胞的形态及表征。方法选择2010年7月至2011年7月49例颈椎骨折、脱位（19例）及颈椎病（30例）患者术中取出的颈椎终板软骨,用酶消化法分别分离培养人正常颈椎椎体终板软骨细胞（对照组）和退变颈椎椎椎体终板软骨细胞（颈椎病组）;用倒置显微镜和HE染色法观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线;甲功蓝染色及反转录-PCR（RT-PCR）法对终板软骨细胞进行鉴定;RT-PCR法检测终板软骨细胞特征性基因蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Ⅰ型胶原的表达。结果人颈椎椎体终板软骨细胞表达特征性蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Ⅰ型胶原,其生长情况及细胞表型类似于关节软骨细胞。对照组原代终板软骨细胞以多角形为主,增殖速度较快;而颈椎病组原代终板软骨细胞以梭形为主,细胞增殖述度较慢。颈椎病组原代终板软骨细胞表达的蛋白多特基因（0.695±0.052）和Ⅱ型胶原基因（0.726±0.035）均低于对照组（0.950±0.032、0.907±0.078,t=7.263、3.681,P=0.002、0.021）,Ⅰ型胶原基因则高于对照组（0.795±0.028比0,552±0.070,t=-5.560,P=0 005）。结论成功建立了人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型,为椎间盘退变机制研究提供了较好的细胞学基础,解决了以前一直以动物细胞模型为研究对象的局限性。