辛伐他汀联合全反式维甲酸对人早幼粒细胞白血病细胞株WT1/hDMP1基因表达的影响

摘要

目的探讨羟甲基戊二酸单酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶的抑制剂辛伐他汀（SV）联合全反式维甲酸（ATRA）对人早幼粒细胞白血病NB4细胞株增殖、分化与凋亡的影响,以及肾母细胞瘤（WT1）基因/转录因子人细胞周期调节蛋白依赖性myb样蛋白1（hDMP1）基因表达变化。方法以不同浓度SV联合ATRA处理NB4细胞,取对数生长期细胞进行实验。各组细胞分别进行细胞形态观察;四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察细胞增殖能力;流式细胞仪测定NB4细胞分化指标CD1 1b和细胞凋亡指标膜联蛋白（Annexin-V）/碘化丙啶（PI）变化;实时（Real-time）RT-PCR测定WT1/hDMP1基因表达变化。结果 15、10、5μmol/L SV单独处理NB4细胞,随着培养时间延长,细胞抑制率增加（F=7.15,P=0.000）,CD1 1b的表达水平逐渐升高（F=3.41,P=0.014）,Annexin-V表达水平逐渐增高（F=43.38,P=0.000）,WT1基因表达水平逐渐降低（F=5.35,P=0.001）,同时伴随着hDMP1基因表达水平的增加（F=22.61,P=0.000）,其中以15μmol/L SV组NB4细胞变化最明显。15μmol/LSV联合ATRA处理NB4细胞培养72 h CD11b（89.46%±9.13%）和hDMP1（626.9±56.9）表达水平明显高于ATRA（71.27%±7.27%和421.8±38.3）和SV（62.41%±6.37%和241.4±21.9）单药处理（均P＜0.05）,两药合用具有明显交互作用（F=4.09,P=0.025和F=29.58,P=0.000）。联合用药对NB4细胞抑制率和Annexin-V表达水平差异无统计学意义。结论 SV以剂量依赖方式体外抑制NB4细胞生长,诱导NB4细胞的分化,促进凋亡,降低WT1表达,升高hDMP1表达,提示SV具有协同治疗急性早幼粒细胞白血病的潜能。