Hsa-miR-206对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的探讨hsa-miR-206对乳腺癌增殖、侵袭及迁移的影响。方法用脂质体转染法将hsa-miR-206模拟体（206m组）与阴性对照（NC组）、抑制体（206i组）及阴性对照（INC组）转染入人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,通过CCK-8法、Transwell试验检测细胞增殖和侵袭力;用分子生物学方法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、乳腺癌转移抑制基因（BRMS）-1和细胞间隙蛋白43（Cx43）的表达;检测临床样本内miR-206及Cx43表达;双荧光素酶报告基因验证miR-206和Cx43的结合。结果（1）206m组细胞活性（0.74±0.16）较对照组（1.12±0.23）低（t=-3.066,P=0.037）,206i组细胞活性（1.43±0.26）比INC组（0.98±0.14）高（t=3.635,P=0.022）。（2）Transwell实验证明较对照组,206m组细胞迁移和侵袭明显降低（迁移:0.56±0.01与0.63±0.01,t=-23.000,P=0.002;侵袭:0.79±0.01与0.99±0.0l,t=-21.200,P=0.002）,而206i组细胞迁移和侵袭明显增加（迁移:0.97±0.11与0.61±0.09,t=32.787,P=0.001;侵袭:1.10±0.01与0.93±0.05,t=5.167,P=0.035）。（3）分子生物学检测发现206m组MMP-2、MMP-9和Cx43的表达降低,BRMS-1表达增高,而206i组MMP-2、MMP-9和Cx43的表达增高,BRMS-1表达降低。（4）临床样本检测发现niR-206在淋巴结阴性组中表达高于淋巴结阳性组（Z=-2.098,P=0.036）,而Cx43的表达则相反。（5）双荧光素酶报告基因验证miR-206和Cx43间存在特异性结合位点（1.00±0.04与0.74±0.04,t=26.911,P=0.001）。结论 Hsa-miR-206对乳腺癌增殖、侵袭及迁移能力存在负调控。这一调控能力通过Cx43实现。