抑制胃癌Hedgehog通路对转化生长因子β诱导的上皮间质化的影响

摘要

目的探讨Hedgehog通路对胃癌转移方面的作用,特别是探讨其在胃癌上皮间质化（EMT）中起的作用。方法利用药物处理（环靶明）或小干扰RNA敲除基因的手段,抑制胃癌的Hedgehog通路,并通过显微镜下观察、Westrn印迹、Transwell侵袭及迁移实验,分别探讨与EMT相关的细胞形态、蛋白质水平及侵袭迁移等功能性改变。结果抑制Hedgehog通路后胃癌细胞的侵袭及迁移能力明显下降。胃癌细胞在转化生长因子（TGF）-β诱导下,细胞呈现梭形的外观、上皮化蛋白（E-钙黏蛋白）水平下调,间质化波形蛋白（Vimentim）水平上调,侵袭及转移能力分别提高3倍及4倍。TGF-β诱导后可上调Hedgehog通路的SonicHedgehog（SHH）及锌指转录因子（Gli）1蛋白的表达水平,提示可激活Hedgehog通路。在TGF-β的持续刺激下,抑制Hedgehog通路可逆转EMT,细胞恢复上皮化外观,E-钙黏蛋白表达上调,Vimentim表达下调,侵袭及迁移能力下调3倍及2倍。结论胃癌Hedgehog通路被抑制后,可逆转TGF-β引起的胃癌EMT化,提示Hedgehog通路在胃癌的转移方面发挥重要的作用。