角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用

摘要

目的构建展示角质细胞生长因子（KGF）噬菌体活性肽,检测其促表皮细胞增殖的作用。方法选择4个KGF序列,设计引物;用反转录-PCR法获得3个KGF、序列（P1、P2和P4）,直接合成1个KGF序列（P3）;将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中;用噬菌体展示技术,将KGF基因片段展示于噬菌体表面;用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用,测定其在570 nm的吸光度（A）值,用免疫荧光法检测其细胞亲和力。结果获得4种KGF基因,构建在噬菌粒pComb3中;通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面。MTT检测的吸光度（A）值结果显示阴性对照组（0.293±0.017）与KGF对照组（0.520±0.043）及4种KGF噬菌体活性肽组（P1～4）（0.469±0.057、0.441±0.048、0.438±0.035、0.446±0.037）间差异均有统计学意义（均P＜0.01）,免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力。结论构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖。