人重组骨形成蛋白2作用下人牙周膜细胞Osterix的表达变化

摘要

目的观察人重组骨形成蛋白2（rhBMP-2）作用下,人牙周膜细胞内Osterix（Osx）mRNA和蛋白的表达变化,初步探讨牙周膜细胞成骨分化过程中BMP-2与Osx的信号传递途径。方法组织块法培养人牙周膜细胞至3代。用含rhBMP-2的培养液,按照不同浓度、不同时间分组进行培养,后采用实时定量反转录（Real-time RT）-PCR和Western印迹法分别检测各组细胞Osx mRNA和蛋白表达变化。选用SB203580抑制细胞p38磷酸化,检测rhBMP-2诱导过程中磷酸化p38（pp38）蛋白、Osx mRNA表达及细胞矿化反应变化。结果在rhBMP-2持续作用下,人牙周膜细胞内Osx mRNA表达明显升高并具有时效性;Osx蛋白表达从无到有,并逐渐增强。当rhBMP-2浓度≤200μg/L时,Osx mRNA和蛋白表达呈现为剂量依赖性增强;当rhBMP-2＞200μg/L时,Osx表达趋于平缓。在p38抑制剂SB203580干扰下,rhBMP-2对p-p38及Osx的诱导增强作用被显著抑制（OsxmRNA表达:0.378±0.034比0.134±0.027,Osx蛋白表达:0.353±0.024比0.155±0.031,均P＜0.01）,矿化结节形成亦相对较少且滞后。结论 BMP-2对Osx具有显著正向调控作用,p38途径是此信号传递过程中的一个重要环节,BMP-2/p38/Osx通路可能是牙周膜细胞成骨分化过程中的一条重要信号通路。