磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶信号通路对结肠癌SW480细胞株的影响及其机制

摘要

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）信号通路对结肠癌细胞SW480的增殖、凋亡及侵袭能力的影响及其可能机制。方法以不同浓度（0、5、10、20、40μmol/L）PI3KAKT通路特异性抑制剂LY294002作用于SW480细胞,通过四甲基偶氮唑盐法（MTT法）检测24、48、72 h后细胞活力;以不同浓度（0、10、20、40μmol/L）LY294002作用于SW480细胞24 h,分别用流式细胞法（FCM）检测各组细胞凋亡率,Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭能力改变,Western印迹法检测各组细胞血管内皮生长因子（VEGF）、金属基质蛋白酶9（MMP-9）的表达;运用单因素方差分析进行统计学分析。结果 MTT法显示除较低浓度组（5μmol/L）外,其余浓度组SW480细胞增殖率均明显低于0μmol/L（对照）组,且有一定的时间-剂量依赖性（均P＜0.05）。流式细胞结果显示,10、20、40μmol/L组凋亡率分别为13.3%±0.9%、30.9%±2.5%、41.2%±4.1%,均明显高于对照组（5.2%±1.8%,均P＜0.05）;细胞侵袭力检测结果显示,10、20、40μmol/L。组穿透膜的细胞数量依次为（87±6）、（65±7）、（46±11）个,除10μmol/L组（P=0.096）外,其余各组均明显低于对照组[（100±10）个,均P＜0.05]。Western印迹法检测各浓度组VEGF、MMP-9表达均少于对照组（均P＜0.05）。结论 PI3K-AKT信号通路是结肠癌细胞株SW480增殖、抗凋亡、侵袭转移的重要因素,其机制可能与抑制VEGF、MMP-9表达有关,PI3K-AKT信号通路可能是结肠癌治疗的潜在靶点。