免疫相关性血细胞减少症患者外周血CD4+T细胞DNA甲基化异常的分析

摘要

目的观察免疫相关性血细胞减少症（IRP）患者CD4+T细胞基因组DNA总体甲基化水平及甲基化相关调控基因的表达水平,探讨甲基化在IRP发病中的作用。方法选取2012年12月至2013年12月天津医科大学总医院血液科确诊的30例IRP患者（15例初治患者,15例恢复患者）及15名健康对照,以免疫磁珠法分选CD4+T细胞,应用ELISA法测定外周血CD+T细胞DNA总体甲基化水平;采用反转录PCR（RT-PCR）技术检测CD4+T细胞中甲基化相关调控基因:DNA甲基化转移酶（DNMT）和甲基结合蛋白（MBD）的mRNA表达水平,并进行相关性分析。结果 IRP患者外周血CD4+T细胞DNA总体甲基化水平初治组和恢复组均明显低于对照组（3.525%±2.046%和4.790%±1.471%比10.101%±3.449%,均P＜0.05）;初治组DNMT3b mRNA表达水平显著低于对照组（1.332±0.785比2.077±1.059,P＜0.05）;初治组、恢复组MBD2 mRNA表达水平显著高于对照组（2.999±1.601和2.055±1.576比0.581±0.247,均P＜0.05）;初治组MBD4 mRNA表达水平显著高于对照组（2.736±2.719比1.167±1.006,P＜0.05）。IRP患者外周血CD4+T细胞DNMT3b mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈正相关（r=0.569,P＜0.01）;MBD2 mRNA表达水平与CD4+T细胞基因组DNA甲基化水平和Th1/Th2水平均呈负相关（r=-0.763,P＜0.01;r=-0.652,P＜0.05）。CD4+T细胞甲基化水平与CD5+B细胞比例呈负相关（r=-0.439,P＜0.05）。结论 IRP患者外周血CD4+T细胞基因组DNA低甲基化和甲基化相关调控基因表达异常可能与IRP发病有关。