LINGO-1基因沉默对自身免疫性脑脊髓炎小鼠运动功能的影响

摘要

目的探讨沉默LINGO-1基因表达对自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠运动功能的影响。方法通过MOG35-55诱导雌性C57/BL6小鼠建立EAE小鼠模型。将EAE小鼠（105只）完全随机分为5组:A组（21只）:侧脑室注入5 μl滴度为5×109 Tu/ml编码LINGO-1shRNA的慢病毒载体（LV/LINGO-1-shRNA）; B组（21只）:侧脑室注入5 μl滴度为5×108 Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;C组（21只）:侧脑室注入5 μl滴度为5×107 Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;D组（21只）:侧脑室注入5 μl无义序列的LVCON053;E组（21只）:未治疗组。动态观察干预后不同时间点小鼠神经功能评分情况及LINGO-1蛋白表达水平, 并行髓鞘快蓝染色了解各组髓鞘脱失情况。结果侧脑室注射LV/LINGO-1-shRNA组EAE小鼠脑组织内LINGO-1蛋白表达从干预后第7天起可见明显下调, 其中以B组和C组下调最明显（1.99±0.13, 2.08±0.10, P＆0.05, P＆0.01）。从第7天开始, 相比较于D组和E组, A组、B组和C组运动功能评分有不同程度地下降[（3.11±0.13）分, （2.42±0.13）分, （2.96±0.10）分比（3.56±0.15）分, （3.87±0.12）分, P＆0.01, P＆0.01,P＆0.05]。30 d时A组和B组髓鞘密度明显高于未治疗组（0.72±0.09, 0.83±0.11比0.56±0.10, P＆0.05, P＆0.01）。结论侧脑室注射LV/LINGO-1shRNA是一种沉默EAE小鼠脑内LINGO-1表达的有效方式。LINGO-1下调可改善EAE小鼠运动功能及促髓鞘修复, 但效果并不随LV/LINGO-1-shRNA剂量增加而增强。