BCYRN1对大鼠哮喘模型中气管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

摘要

目的探讨大脑细胞质RNA 1（BCYRN1）对大鼠哮喘病模型中气管平滑肌细胞（ASMCs）增殖和迁移的影响。方法取雄性SD大鼠20只按随机数字法分为对照组和哮喘组各10只。哮喘组利用卵清蛋白（OVA）构建大鼠慢性哮喘模型, 从大鼠气管组织中分离ASMCs, 实时荧光定量PCR检测BCYRN1的mRNA水平。ASMCs转染Ad-BCYRN1, 2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2, 4-二磺苯基）-2H-四唑（WST-1）法和实时细胞分析仪实验检测ASMCs的增殖变化, Transwell迁移实验检测ASMCs的迁移能力变化。用血小板衍生的生长因子BB（PDGF-BB）处理ASMCs以诱导其增殖, 荧光定量PCR检测BCYRN1的mRNA水平;进一步细胞转染si-BCYRN1, 检测ASMCs增殖和迁移能力变化。为检测BCYRN1下调对大鼠呼吸系统吸气和呼气阻力的影响, 另取雄性SD大鼠40只按随机数字法分为正常组（A组）、致敏+Ad-GFP组（B组）、致敏+Ad-SM22α-si-BCYRN1组（C组）和正常+Ad-SM22α-si-BCYRN1组（D组）各10只。B、C、D组大鼠用鼻喷雾剂将相应腺病毒载体传递至肺后, B、C组的大鼠用OVA处理, A、D组大鼠则用等体积的生理盐水处理。在最后一次用OVA或生理盐水处理24 h后, 各组大鼠气管插管, 连接呼吸机。静脉注射乙酰甲胆碱, 用气管乙酰甲胆碱反应评估各组大鼠呼吸系统吸气和呼气阻力变化。结果哮喘组ASMCs中BCYRN1相对表达水平显著高于对照组（3.60±0.45比1.00）;PDGF-BB处理的ASMCs中BCYRN1相对表达水平也显著高于对照组（3.53±0.35比1.00）（均P＆0.01）。ASMCs转染Ad-BCYRN1后, BCYRN1表达显著增加;且转染Ad-BCYRN1组中细胞活力及细胞增殖率分别是对照组的1.75倍和1.47倍, 迁移率是对照组的2.42倍（均P＆0.01）。抑制BCYRN1的表达逆转PDGF-BB诱导的ASMCs增殖率和迁移上升。PDGF-BB处理的细胞增殖率和迁移细胞数均显著大于转染si-BCYRN1后的细胞[（4.87±0.21）%比（3.63±0.21）%和80.00±5.00比25.33±2.52, 均P＆0.01)]。下调BCYRN1表达降低大鼠吸气阻力和呼气阻力;当乙酰甲胆碱浓度达1 mg/kg时, A、B、C、D组吸气阻力分别为（8.27±0.21）、（25.40±0.56）、（12.07±0.67）、（8.40±0.46）cmH2O·s·ml-1, 呼气阻力分别为（13.30±0.56）、（38.37±1.33）、（16.40±0.56）、（13.40±0.46）cmH2O·s· ml-1（均P＆0.01）。结论过表达BCYRN1促进大鼠哮喘模型气管平滑肌细胞增殖和迁移。