雷公藤红素对游离脂肪酸诱导HepG2细胞Toll样受体4通路的影响

摘要

目的探讨雷公藤红素对游离脂肪酸（FFAs）诱导肝细胞的干预作用及相关机制。方法以人肝癌细胞株HepG2为研究对象, 脂质体转染Toll样受体4（TLR4）siRNA, 荧光定量PCR检测干扰效率。给予FFAs、雷公藤红素干预, 未处理的HepG2细胞作为正常对照组。油红O染色观察细胞脂质沉积情况;应用Western印迹检测TLR4及相关信号通路蛋白髓样分化因子88（MyD88）, 核因子κB（NF-κB）p65, 白细胞介素（IL）1β, 肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平。各组间计量资料比较采用单因素方差分析。结果 0.5 mmol/L FFAs处理24 h, 油红O染色镜下可见HepG2细胞内大量红色脂滴, 0.5 μmol/L雷公藤红素干预后红色脂滴明显减少。与正常对照组相比, FFAs组TLR4及下游炎症介质蛋白表达明显升高, 差异均有统计学意义（均P＆0.05）;与FFAs组相比, TLR4 siRNA和雷公藤红素均有效抑制TLR4蛋白表达（0.69±0.14, 1.63±0.12比2.46±0.23, 均P＆0.01）, 并使下游炎症介质MyD88 （1.21±0.12, 1.35±0.18比1.62±0.19）、NF-κBp65（1.69±0.14, 1.54±0.36比2.19±0.47）、IL-1β（1.51±0.16, 1.45±0.38比1.82±0.27）、TNF-α（1.60±0.14, 1.41±0.29比1.88±0.19）表达明显减少（均P＆0.01）;与FFAs+TLR4 siRNA相比, FFAs+TLR4 siRNA+雷公藤红素联合应用组MyD88（1.09±0.23比1.21±0.12）、NF-κBp65（1.24±0.20比1.69±0.14）、IL-1β（1.28±0.31比1.51±0.16）、TNF-α（1.10±0.29比1.60±0.14）表达进一步减少（均P＆0.01）。结论 TLR4介导的信号通路可能是雷公藤红素改善肝细胞脂肪变性的机制之一。