A20诱导沉默对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的观察A20基因表达下调对鼻咽癌细胞体内外增殖、侵袭及转移能力的影响。方法筛选并建立Tet-on基因表达系统诱导A20沉默的鼻咽癌肝转移亚系5-8F-H3细胞系, 实时荧光定量PCR、Western印迹检测干扰效率;CCK8法、平板克隆形成实验检测A20对5-8F-H3增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞周期;侵袭小室检测A20对5-8F-H3侵袭能力的影响;裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验检测经强力霉素（DOX）诱导A20基因表达沉默对5-8F-H3在体内增殖及转移能力的影响。结果可诱导沉默A20的鼻咽癌细胞5-8F-H3/A20-shRNA构建成功。5-8F-H3/A20-shRNA经DOX诱导后, A20基因mRNA及蛋白的表达均下调（均P＆0.01）;CCK8法（F=18.542, P=0.003）、平板克隆形成实验（F=40.080, P＆0.001）及流式细胞术检测实验（F=7.398, P=0.024）结果显示A20基因表达下调明显抑制5-8F-H3在体外增殖能力;侵袭小室检测结果显示A20基因表达下调抑制5-8F-H3在体外侵袭能力（F=26.157, P＆0.001）。裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验结果显示A20基因表达下调明显抑制5-8F-H3在裸鼠体内的成瘤和转移能力。结论 A20与鼻咽癌多种恶性生物学行为密切相关, 有望成为鼻咽癌潜在治疗靶点。